Ir o contido principal
Este portal emprega cookies propias ou de terceiros con fins analíticos, así como ligazóns a portais de terceiros para poder compartir contido nas redes sociais. Pode obter máis información na <a href="https://pro-assets-usc.azureedge.net/gl/aviso-legal">política de cookies</a>.

Localización

Edificio de apoio á investigación (CACTUS)
Rúa de Constantino Candeira, 1. Campus Vida , 15782
Santiago de Compostela
Teléfonos
881 816 242
  • Equipo operativo
Análise directo con fonte MALDI, onde non se emprega ningún método de separación cromatográfico no sistema de introdución de mostra. Técnica empregada para a análise de mostras que son puras ou cunha pureza relativamente alta, de polaridade baixa-alta e onde se obtén o espectro xeral da mostra.
  • Técnica empregada para a determinación de masa molecular onde se obtén o espectro xeral da mostra no rango de masas analizado. Pódese realizar medidas en modo lineal (baixa resolución) ou modo reflector (alta resolución, rango de masas 50-4000 Da); con polaridade positiva ou negativa. 

    As mostras enviaranse sólidas ou en disolución nun vial etiquetado co seu código identificativo, e ter unha concentración axeitada segundo a seguinte táboa:

    Táboa: guía de concentración das mostras para MALDI

    CONCENTRACIÓN NECESARIA PARA ANÁLISIS MALDI

    MW (Da)

    µg/ml

    500 

    10-25 

    1.000 

    20-50 

    2.500 

    50-130 

    5.000 

    100-250 

    10.000

    200-500

    20.000

    400-1.000

    >20.000

    >1.000

    Convén non empregar disolventes como DMSO ou DMF, e evitar a presenza de sales que poden interferir na mostra (NaCl, NaOAc...). No caso de que a mostra teña sales, pódese realizar un desalgado previo (servicio facturable) co “Desalgado Zip-Tip”.

    As mostras a analizar serán mesturadas con unha matriz orgánica segundo o protocolo estándar da Unidade e depositada na superficie metálica da placa MALDI. No caso de que se necesite medir as mostras noutras matrices, distintas ás habituais das que dispón a Unidade, ou si se precisa dun protocolo específico de preparación, o usuario debe indicalo no apartado de “Observacións” do Formulario de Solicitude de Servicio ou poñerse en contacto coa Unidade.

    Matrices:

    As matrices empréganse dependendo do tipo de analito a medir, podendo ser necesario á adición de algún tipo de aditivo. As matrices e aditivos coas que conta a Unidade actualmente, e que son as máis habituais en MALDI, son as seguintes:

    Matrices: Nome

    Abreviatura

    Aplicacións

    Ácido α-ciano-4-hidroxicinámico

    HCCA

    Péptidos

    Proteínas (< 5 KDa)

    Ácido sinapínico

    SA

    Proteínas (10-150 KDa)

    Péptidos (> 3 KDa)

    Ácido 2,5-dihidroxibenzoico  

    DHB

    Péptidos

    Proteínas

    Polímeros

    Hidratos de carbono

    Lípidos/Glicolípidos

    1,8,9-trihidroxiantraceno (Dithranol)

    DIT

    Polímeros non polares

    Trans-2-[3-(4-tert-Butilfenil)-2-metil-2-propenilideno]malonitrilo

    DCTB

    Analitos non polares

    3-Hyproxy picolinic acid

    HPA

    Oligonucleótidos

    2,6-Dihydroxyacetophenone

    DHAP

    Proteínas intactas

    1,5-Diaminonaphthalene

    DAN

    Proteínas intactas

    Aditivos: Nome

    Abreviatura

    Aplicacións

    Silver Nitrate

    AgNO3

    Axente catiónico

    Silver Trifluoroacetate 

    AgTFA

    Axente catiónico

    Sodium Trifluoroacetate

    NaTFA

    Axente catiónico

    Sodium iodide

    NaI

    Axente aniónico

    Sodium chloride

    NaCl

    Axente aniónico

    Para outro tipo de matrices, por favor contactar coa Unidade.

    Aínda que os equipos empregados en MALDI poden adquirir espectros en Alta Resolución (modo Reflector), non realizan a Medida de Masas Exactas, xa que non é unha técnica axeitada para ese servizo adicional. Polo contrario, pódese facilitar ó usuario unha comparativa visual do pico experimental co teórico da fórmula facilitada, pero sen os datos estatísticos da MME.

    Instrumentación: Autoflex (Bruker), Ultraflex III (Bruker).

  • Unidade de Espectrometría de Masas e Proteómica

    Edificio de Apoio á Investigación (CACTUS)
    • Rúa de Constantino Candeira, 1. Campus Vida , 15782
      Santiago de Compostela
    • 881 816 242